實驗目的:吉林某研究院用含待測水樣(野外采集含重金屬水樣)的培養(yǎng)液對斑馬魚胚胎進行培養(yǎng),實驗用冷凍研磨儀對培養(yǎng)后的斑馬魚進行研磨,提取其體內核酸和蛋白質與凈水培養(yǎng)的斑馬魚進行對比,探究其基因表達差異,進行重金屬毒性檢測評估。
實驗準備:冷凍研磨儀一臺,2ml*24不銹鋼適配器一個、2ml塑料研磨管若干,以及實驗組和對照組斑馬魚各20條
斑馬魚樣品前處理實驗研磨步驟:
1.把實驗開始前準備好的斑馬魚魚苗剪切成小塊狀,把剪切后小塊狀樣品加入2ml塑料離心管內,再在離心管放入適量規(guī)格的研磨珠,再加入適量的PBS緩沖液,但要記得留出管內三分之一的空余位置
2.啟動儀器,打開機器的操作界面將其儀器的程序參數進行調節(jié)設置,將其溫度設置到零下50°C,研磨次數1次
3.把準備好的樣品研磨管放入研磨儀的適配器內,適配器固定到研磨儀中,關閉儀器的蓋咨,開始儀器程序的運行
4.待儀器程序運行結束后,即可打開儀器取出樣品研磨管,即可進行后續(xù)樣品組織的核酸與蛋白的提取純化
斑馬魚樣品前處理實驗研磨效果:
冷凍研磨儀對斑馬魚樣品的前處理研磨效果由上圖可看出,樣品組織被均勻地混勻破碎,其樣品處理效果滿足實驗需求,可用于后續(xù)對樣品組織的實驗檢測分析。
冷凍研磨儀在前處理研磨斑馬魚樣品時具有以下性能優(yōu)勢:
1.保護生物活性:在低溫條件下研磨,能夠有效保護斑馬魚體內易失活的生物大分子,核酸、蛋白質、酶等,較大程度地維持其生物活性
2.防止氧化:重金屬可以誘導氧化應激反應,使斑馬魚體內氧化物和抗氧化酶含量增多。低溫減少了樣本中易氧化成分的變質,保障實驗結果的準確性
3.降低污染風險:獨立的研磨管,避免了樣本間的交叉污染,確保實驗數據的可靠性
4.高效破碎:采用三維一體8字形研磨方式,快速高效率地破碎斑馬魚組織和細胞,使細胞內的物質充分釋放,提高后續(xù)實驗的提取效率
冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN是一種快速、高效、制冷的研磨系統(tǒng)。它能在非常短的時間內將毛發(fā)、土壤、植物和動物的組織/器官、細菌、酵母、真菌、孢子、古生物標本等樣品完成研磨、粉碎、混合機細胞破壁。